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高铁还原酶(FCR)活性测定试剂盒科研

简要描述:

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更新时间:2022-01-27

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高铁还原酶(FCR)活性测定试剂盒科研

产品简介:

产品名称:高铁还原酶(FCR)活性测定试剂盒科研

规格:48样 96样

货号:AS044

检测方法:可见分光光度法 微板法

产品分类:氧化应激系列

贮存温度:2~8℃。

本试剂盒保质期:6个月。本产品仅用于科研实验

试剂的组成和配制:

提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;

试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;

试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;

试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;

试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。23.png

 

所需的仪器和用品:

 

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验

样本和试剂浪费!

1、样本制备

① 组织样本:

取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行

匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。

【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取

② 细菌/细胞样本:

先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL

提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);

12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10

4):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。 ③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。

Enkephalin/P-ENK  脑啡肽抗体 规格: 0.1ml

SP-B  肺表面活性B抗体 规格: 0.1ml

GYPB/CD235b  型糖δ抗体 规格: 0.2ml

EPOR  红细胞生成受体抗体 规格: 0.1ml

Rabbit Anti-chicken IgM/PE  PE标记的兔抗鸡IgM 规格: 0.1mlGALT  磷半糖尿转移1抗体 规格: 0.2ml

Mouse Anti-Rabbit IgM/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555标记的小鼠抗兔IgM 规格: 0.1ml

Fc ε RIα/Fc epsilon RI  FC段IgE受体α多肽抗体 规格: 0.1ml

C12ORF54  12号染色体开放阅读框54抗体 规格: 0.2ml

phospho-ECT2 (Thr790)  磷化上皮细胞转化2抗体 规格: 0.1ml

CCDC17  卷曲螺旋结构域17抗体 规格: 0.2ml

A2AR/Adenosine A2a receptor  A2A受体抗体 0.1ml

高铁还原酶(FCR)活性测定试剂盒科研23184-66-9丁;纯品型;标准品;有证书 规格: 0.1g

480-44-4金合欢 规格: 20mg

26787-78-0阿莫林 规格: 100mg

466-26-2里奥林 规格: HPLC≥98%;20mg

规格: 20mg

60-33-3α-亚油;α-Lileic aci 规格: 20mg

14144-06-0延龄草 规格: 20mg

572-30-5扁蓄 规格: 20mg

552-41-0丹皮;Paeol 规格: 200mg

552-66-9大豆 规格: 20mg

操作步骤:

实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。

1.        加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

2.        弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

4.        每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。

7.       依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8.       用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。

 


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