人肝内胆管上皮细胞*培养基说明书

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人肝内胆管上皮细胞*培养基说明书细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
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人肝内胆管上皮细胞*培养基说明书细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

1,000 URNA Polymerase, T3, 1000 U

1 kit (25 reactions)PCR Dig Probe Synthesis 1pc

2.5 gCollagenase H, 2.5g, non-steri

1,000 U (4 x 250 U) for up to 2,000 reactions of 20 µl final volume each containing 0.5 U Taq DNA PolymeraseTaq DNA Polymerase, 5 U/μl（up to 3 kb）

1,000 U (4 x 250 U) for up to 2,000 reactions of 20 µl final volume each containing 0.5 U Taq DNA PolymeraseTaq DNA Polymerase, 1 U/μl（up to 3 kb（）

2,500 U (10 x 250 U) for up to 5,000 reactions of 50 µl final volume each containing 0.5 U Taq DNA PolymeraseTaq DNA Polymerase, 5 U/μl（ up to 3 kb）

125 U for up to 50 reactions of 50 µl final volume each containing 2.5 U FastStart Taq DNA PolymeraseFastStart High Fidelity PCR System, dNTPack（up to 5 kb）

2,500 U (10 x 250 U)FastStart Taq DNA Polymerase,
人肝内胆管上皮细胞*培养基说明书杆菌属 Lactobacillus sp.烬灰链霉菌 Streptomyces cinereogriseus

人脐静脉血管内皮细胞CCD-1095Sk(人腺浸润性导管旁皮肤细胞)

酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae人急性混合型白血病细胞

酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeA2(人腺样囊性细胞)

大肠杆菌 Escherichia coli毛柄金钱菌(金针菇) Flammulina velutipes

佛罗里达侧耳 Pleurotus florida酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

C-33 A(人子宫颈细胞)猴菌

费氏中华根瘤菌 Sinorhizobium frediiAsPC-1(人胰腺细胞)

烟曲霉 Aspergillus fumigatus金色链霉菌 Streptomyces aureus

NIH 3T3/小鼠成纤维细胞Caki-2(人肾透细胞细胞)

苏云金芽孢杆菌 Bacillus thuringiensis黑木耳 Auricularia auricula

酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae小鼠肺大静脉平滑肌细胞*培养基

人颅盖造骨细胞*培养基毛柄金钱菌(金针菇) Flammulina velutipes