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RT-betway888必威 的两种检测模式介绍
点击次数:348 更新时间:2022-12-01
  RT-betway888必威 具有敏感性高、特异性强、快速等特点,目前广泛应用于农兽药、真菌残留检测,该方法从加样、洗板、显色到读数步骤繁多,其中任何一步控制不好都可能影响检测结果的准确性。
 
  今天要为大家介绍的是RT-betway888必威 的两种检测模式:
 
  1、双杂交探针模式(FRET):FRET探针又称双杂交探针,FRET探针由两条相邻探针组成,在一条探针端标记FAM荧光基团,另一探针端标记Red640荧光基团。当复性时,探针结合在模板上,FAM基团和Red640基团相邻,激发FAM产生的荧光,作为Red640基团的激发光被吸收,使Red640发出波长为640的荧光。当变性时,探针游离,两基团距离远,不能产生640波长的荧光。由于FRET探针是靠近发光,所以检测信号是实时信号,非累积信号。
 
  2、交探针模式(Beacon):分子信标是一种呈发夹结构的茎环寡核苷酸探针,两端的核酸序列互补配对,因此标记在一端的荧光基团与标记在另一端的淬灭基团紧紧靠近。荧光基团被激发后产生的光子被淬灭剂淬灭,由荧光基团产生的能量以红外而不是可见光形式释放出来。分子信标的茎环结构中,环一般为15-30个核苷酸长,并与目标序列互补;茎一般5-7个核苷酸长,并相互配对形成茎的结构。荧光基团标记在探针的一端,而淬灭剂则标记在另一端。在复性温度下,因为模板不存在时形成茎环结构,当加热变性会互补配对的茎环双链解开,如果有模板存在环序列将与模板配对。与模板配对后,分子信标将成链状而非发夹状,使得荧光基团与淬灭剂分开。当荧光基团被激发时,因淬灭作用被解除,发出激发光子。由于是酶切作用的存在,分子信标也是积累荧光。
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