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无需常规核酸提取即可进行检测
点击次数：398 更新时间：2021-04-14
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指的是在PCR进行的同时，对其过程进行监测的能力（即实时）。因此，数据可在PCR扩增过程中，而非PCR结束之后，进行收集。这为基于PCR的DNA和RNA定量方法带来了变革。
在实时荧光定量PCR中，反应以循环中检测到目标扩增的时间点为特征，而非在一定循环数后目标分子素计的扩增量。目标核酸的起始拷贝数越高，则会越快观察到荧光的显著增加。相反，终点法检测（也称“读板检测”）测量的是PCR循环结束时素计的PCR产物量。
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无需常规核酸提取，仅需对样品进行简单研磨、离心处理，即可开始后续核酸检测。在保证检测结果准确可靠的前提下，简化了检测步骤，将检测时间缩短至不到1小时，成为适合于屠宰场、养殖场的技术。
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“变性-退火-延伸”三个步骤的实现方法是：
1、变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，为下轮反应作准备；
2、退火：退火也叫复性，模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，在这个温度下，模板DNA单链能够与引物的互补序列配对结合；所谓引物，是一段已经确定好的DNA的片段，通过引物找到模板DNA的相应位置，也就是确定了复制的起点；
3、延伸：DNA模板-引物结合物在72℃、DNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按照碱基互补配对原则和半保留复制原理，就能合成一条新的与模板DNA链互补的复制链。
希望上述内容能够帮助大家更好的了解本试剂盒。
