兔核因子κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)ELISA试剂盒操作步骤：
1．试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。 
2．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。 
3．不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。 
4．使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。 
5．使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。 
6．洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。 
7．底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。 
8．加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。 
9．按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

兔核因子κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)ELISA试剂盒注意事项：
1.不同的试剂盒因工艺和操作方法略有不同，务必按照所用试剂盒严格操作，否则容易产生检测结果的不确定性。
2.若不同批号人ELISA试剂盒的不同组分(A液或酶工作液)，或不同试剂的不同组分进行交叉使用，有可能出现显色浅或本底高，花板等情形。
3.反应时间的误差，做大量标本时，*孔和zui后一孔以及一些特殊标本可能影响较大。
4.临界值附近标本波动为正常现象，任何试剂均不可避免。可以考虑将标本做奇数次复检。
5.加样时样品量误差，对于阴或很阳的标本影响不大，但对阈值附近的标本影响极大，建议校对加样器。