FN elisa检测试剂盒操作步骤: 1、加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。 2、温育:用封板膜封板后置 37℃温育30分钟。 3、配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用 4、洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此 重复5次,拍干。 5、加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。 6、显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色 10 分钟. 7、终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。 8、测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。 FN elisa检测试剂盒注意事项: 1.严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。 2.洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。 3.消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。 4.底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。 5.避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。 6.在储存和温育时避免强光直接照射。 7.平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。 8.任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。 9.不能使用过期产品。 10.如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。 |