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大鼠ELISA试剂盒操作的任一步骤出错都会影响测试结果
点击次数:545 更新时间:2019-02-28
   对于任何一种ELISA试剂盒来说,保存工作都是使用者需要注意的,这样才不会影响到试剂盒的运用,大鼠ELISA试剂盒也不例外,那么对于大鼠ELISA试剂盒来说,应如何做好保存工作呢,接下来就随着小编一起来看看吧。
  1、大鼠ELISA试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可运用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
  2、浓洗刷液可能会有结晶分出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗刷时不影响成果。
  3、各步加样均应运用加样器,并常常校对其准确性,以避免试验误差。
  4、请每次测定的一起做规范曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于规范品孔*孔的OD值),请先用样品稀释液稀释必定倍数(n倍)后再测定,核算时请乘以总稀释倍数(×n×5)。
  我们知道,大鼠ELISA试剂盒实验通常为采用手工操作的以微孔板条为固相的测定模式,试剂盒操作简单,涉及到标本的收集保存、试剂准备、加样、温育、洗板、显色、比色、结果判断和结果报告及解释等方面,其中任一步骤的不当都会影响测定结果,且尤以加样、温育和洗板等步骤为甚。大鼠elisa试剂盒正确的加样方法应为45度,吸头贴着孔壁加入,应注意角度太小,会使液体残留在孔壁上,导致加样不准确;吸头应当贴着管壁和液面的交界处。
  此外,冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠倒混和,不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落,所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作,也可加入适当防腐剂。
  后一点,血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外,其他成份均同等于血清。制备血浆标本需借助于抗凝剂,而血清标本只要待血清自然凝固、收缩后即可取得。除特殊情况外,在医学检验中均以血清作为检测标本。在大鼠elisa试剂盒中血浆和血清可同等应用。血清标本可按常规方法采集,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP为标记的大鼠elisa试剂盒测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。
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