兔核因子κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)ELISA试剂盒  注意事项

1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未

用完，板条应装入密封袋中保存。

2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间

控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4． 请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值

大于标准品孔孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计

算时请Zui后乘以总稀释倍数（×n×5）。

5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物请避光保存。

7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9．本试剂不同批号组分不得混用。  

兔核因子κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)ELISA试剂盒   实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中兔核因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)水平。用纯化的兔核因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入核因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)，再与HRP 标记的核因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的核因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中兔核因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)浓度。